| 廠家直供人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT |
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價(jià)格：198000 元(人民幣) | 產(chǎn)地：本地 |
| 最少起訂量：1 | 發(fā)貨地：本地至全國 | |
| 上架時(shí)間：2019-11-08 11:37:15 | 瀏覽量：81 | |
上海朗頓生物科技有限公司
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人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）酶聯(lián)免疫檢測 人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT用途： 用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的測定。 人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT工作原理 本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平。 向預(yù)先包被了人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入腫瘤壞死因子-α（TNF-α），溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗TNF-Α抗體，再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。 顏色的深淺與樣品中人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的濃度呈正相關(guān)。 試劑盒組成 1?標(biāo)準(zhǔn)品（960ng/L）?0.5ml?7?顯色劑A液?3ml 2?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?3ml?8?顯色劑B液?3ml 3?酶標(biāo)包被板?12孔×4條?9?終止液?3ml 4?鏈霉親和素-HRP?3ml?10?說明書?1份 5?20倍濃縮洗滌液?20ml?11?封板膜?2張 6?生物素標(biāo)記的抗- TNF-Α抗體?1ml?12?密封袋?1個(gè) 需要而未提供的試劑和器材 1．?37℃恒溫箱。 2．?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。 3．?精密移液器及一次性吸頭 4．?蒸餾水， 5．?一次性試管 6．?吸水紙 注意事項(xiàng) 1．?從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。 酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 2．?各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。 3．?嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。 4．?為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。 5．?不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。 不同批號(hào)的試劑不要混用。 保質(zhì)前使用。 6．?底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。 根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。 自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。 標(biāo)本要求 1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 操作程序 1．?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：（本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋）： 480ng/L?（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）?120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 240ng/L?（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）?120μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 120ng/L?（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）?120μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 60ng/L?（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）?120μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 30ng/L?（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）?120μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 2．?根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。 每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。 3．?加樣：1）空白孔：空白對照孔不加樣品，生物素標(biāo)記的抗IGFBP-3抗體，鏈霉親和素-HRP，其余各步操作相同 ；2）標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl，鏈霉親和素-HRP50μl（標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素標(biāo)記抗體，故在操作時(shí)不加，只加鏈霉素-HRP）；3）樣本反應(yīng)孔：加入樣本40μl，然后各加入抗- TNF-Α抗體10μl、鏈霉親和素-HRP（空白孔除外）50μl。 蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育60分鐘。 4．?配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 5．?洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 6．?顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。 7．?終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 8．?測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度。 也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。 操作程序總結(jié)： 準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品 加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，生物素標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)60分鐘 洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10分鐘 加入終止液 10分鐘之內(nèi)讀OD值 計(jì)算 檢測范圍：3ng/L→900ng/L。 規(guī)格：??? 48T/盒 保存：??? 2-8℃ 有效期：? 6個(gè)月（2-8℃）。 ? 
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